CONSERVAÇÃO IN VITRO E EX SITU E VALORIZAÇÃO DE ENDEMISMOS IBÉRICOS DAS APIACEAE PORTUGUESAS

Ana Cristina Pessoa Tavares dos Santos

Embriogénese somática

Segmentos foliares e segmentos de raiz (0,5-1 cm comprimento) provenientes da germinação in vitro de sementes (Fig. 14b) foram cultivados em meio MS contendo 2,4-D. Decorridos 2,5 meses de cultura formaram-se calos embriogénicos (Fig. 16a) e verificou-se que a resposta in vitro de segmentos foliares e de segmentos radiculares após 2,5 meses de cultura foi muito semelhante para os dois tipos de explantes (Tabelas 15 e 16).

Tabela 15: Efeito da concentração de 2,4-D na indução de calo embriogénico em segmentos de raízes de D. carota subsp. halophilus após 2,5 meses de cultura.


2,4-D (mg/L)

Nº de explantes cultivados

Indução (%)

Nº de calo/explante*

0,1

48

100

    1 ± 0,04

0,5

34

100

0,87 ± 0,08

1

41

100

0,86 ± 0.04

2

44

100

0,91 ± 0,04

*Cada valor é a média com erro padrão de três réplicas.

Tabela 16: Efeito da concentração de 2,4-D na indução de calo embriogénico em segmentos foliares de D. carota subsp. halophilus após 2,5 meses de cultura.


2,4-D (mg/L)

Nº de explantes cultivados

Indução (%)

Nº de calo/explante*

0,1

55

100

0,70 ± 0,09

0,5

56

100

0,78 ± 0,03

1

53

100

0,84 ± 0,09

2

47

100

0,64 ± 0,09

*Cada valor é a média com erro padrão de três réplicas.

A partir dos calos desenvolveram-se embriões somáticos, ainda no mesmo meio ou após 1,5 meses de subcultura em meio sem hormonas (Fig. 16b). Alguns dos embriões somáticos germinaram precocemente (Fig. 16c), mas a maioria deles desenvolveu-se normalmente passando pelas diferentes fases do desenvolvimento embrionário (globular, cordiforme, torpedo e cotiledonar). A formação de embriões somáticos não foi sincronizada, e todas as fases de desenvolvimento foram observadas no mesmo explante (Fig. 16b). O número de embriões somáticos por explante foi também bastante variável, com alguns explantes a produzirem apenas alguns embriões, enquanto outros originaram mais de 100 (Fig. 16b).
Os embriões somáticos atingiram o estádio cotiledonar de desenvolvimento em meio com 2,4-D (Fig. 16d) e foram então transferidos para um meio sem auxina onde germinaram e se desenvolveram em plântulas (Figs. 16e, 16f). As plântulas foram removidas dos tubos de ensaio (Fig. 16g) e transferidas para vasos (Fig. 16h) em condições semelhantes às descritas na secção anterior. A taxa de sobrevivência das plantas foi próxima de 100%, mas as plântulas produzidas por embriogénese apresentavam-se, em geral, mais finas e menos vigorosas do que as produzidas pela proliferação de meristemas.

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