CONSERVAÇÃO IN VITRO E EX SITU E VALORIZAÇÃO DE ENDEMISMOS IBÉRICOS DAS APIACEAE PORTUGUESAS

Ana Cristina Pessoa Tavares dos Santos

Daucus carota L.: análise das subespécies nativas em Portugal

Material vegetal - identificação e localização geográfica

A colheita de exemplares das quatro subespécies nativas de Daucus carota foi realizada em populações naturais de Portugal Continental conforme indicado na Figura 3 e na Tabela 2, para estudos morfológicos e análise do teor de DNA.
As cinco províncias onde se realizaram as colheitas foram: Algarve - Ag; Alto Alentejo - AAL; Baixo Alentejo - BAl; Beira Litoral - BL; Estremadura - E.
Paralelamente foi realizada a caracterização dos óleos essenciais, em amostras do mesmo material vegetal, conforme descrito na secção 2.3.
As herborizações foram repetidas durante ciclos anuais diferentes, nas mesmas localidades e nas mesmas populações.
Espécimes testemunhos foram preparados in situ para a determinação taxonómica e depositados no Herbário COI (anexo I).

Tabela 2: Locais e períodos de colheita das quatro de subespécies nativas de Daucus carota utilizadas nos estudos morfológicos, na análise do teor em DNA e na caracterização de óleos essenciais.

*Localidades e datas de colheita das plantas para o estudo dos óleos essenciais.

Análise morfométrica dos frutos

A análise da morfometria dos frutos das quatro subespécies nativas de Daucus carota foi realizada num total de 33 plantas (subsp. carota, n = 10; subsp. gummifer, n = 10; subsp. halophilus, n = 9; subsp. maximus, n = 4) conforme se indica na Tabela 3 e no anexo II.

Tabela 3: Espécimes investigados para o estudo dos frutos de populações nativas das quatro subespécies de Daucus carota.

Três frutos foram colhidos por planta e conforme a metodologia descrita na secção 2.1.2., procedeu-se à análise morfométrica com base nos seguintes carateres: comprimento, largura, comprimento dos espinhos, largura da base do espinho e número dos espinhos nas costas secundárias.
A análise estatística descritiva (média e desvio padrão da média) das variáveis ​​quantitativas foi calculada para cada subespécie. O teste one-way ANOVA foi utilizado para avaliar as diferenças entre subespécies para as variáveis ​​consideradas. As análises de variância foram realizadas utilizando os valores médios para cada amostra para evitar a pseudo-replicação. As duas variáveis, largura de fruto e largura das costas secundárias do fruto, foram transformadas com a função logaritmo para conseguir a normalidade e homocedasticidade. Todas as demais variáveis apresentam distribuição normal e homocedástica. As análises multivariadas foram realizadas para investigar a organização estrutural das subespécies estudadas com base nos carateres combinados dos frutos.
A análise de componentes principais (PCA) foi realizada utilizando os valores médios das amostras e de todas as variáveis.
Em complemento deste estudo foi analisado o detalhe dos frutos, particularmente ao nível da morfologia dos espinhos, em microscopia SEM.

Teor em DNA e nível de ploidia

Para a estimativa do nível de ploidia e conteúdo de DNA nuclear em plantas das diferentes populações foi utilizada a técnica de citometria de fluxo descrita na secção 2.1.3.
Folhas frescas de plantas foram recolhidas das populações silvestres das quatro subespécies nativas Daucus carota. O conteúdo em DNA foi estudado até 6 indivíduos por população (normalmente em 3 indivíduos/população) de cada uma das quatro subespécies da Tabela 2.

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