CONSERVAÇÃO IN VITRO E EX SITU E VALORIZAÇÃO DE ENDEMISMOS IBÉRICOS DAS APIACEAE PORTUGUESAS

Ana Cristina Pessoa Tavares dos Santos

Óleos essenciais e quimiotaxonomia

Daucus carota L.

O estudo da quimiotaxonomia das subespécies deste taxon concretizou-se com a avaliação morfológica das plantas, dos frutos e do teor em DNA, conforme apresentado na secção 3.1.3.1. Relativamente às mesmas populações, referidas na seção 2.1.4., complementou-se este estudo com a análise dos óleos essenciais obtidos de D. carota subsp. halophilus, D. carota subsp. carota, D. carota subsp. gummifer e D. carota subsp. maximus.
Foram realizadas várias amostragens em várias populações e localidades de Portugal Continental, conforme indicámos na Tabela 39, para que os resultados pudessem ser representativos e se pudessem correlacionar com os outros carateres estudados (carateres morfológicos e genoma). 
A composição qualitativa e quantitativa dos óleos essenciais das quatro subespécies nativas de Portugal Continental está descrita na Tabela 39 onde os compostos estão eluídos de acordo com a coluna de polidimetilsiloxano.
Na tabela estão indicados para cada composto os valores mínimos e máximos encontrados nos óleos das várias amostras analisadas.
Os óleos dos quatro taxa foram obtidos de plantas na mesma fase vegetativa. Apesar de se observar alguma variabilidade intra-específica, provavelmente devida às diferentes condições edafoclimáticas em que vegetam as plantas nas várias populações, observou-se que os hidrocarbonetos monoterpénicos e os monoterpenos oxigenados foram sempre os principais grupos de constituintes identificados nos óleos de D. carota subsp. carota e D. carota subsp. gummifer, enquanto que os hidrocarbonetos monoterpénicos e os fenilpropanóides foram dos principais grupos de compostos identificados nos óleos de D. carota subsp. maximus e D. carota subsp. halophilus. Foram observadas algumas diferenças importantes no que respeita aos componentes principais dos óleos destes quatro taxa.
D. carota subsp. maximus tem a asarona como constituinte característico, uma vez que este é um composto importante neste taxon (5,8-25,8%) e está ausente em todos as outras subespécies. Além deste composto outros fenilpropanóides estão também muito bem representados neste taxon, como o E-metilisoeugenol (8,2-15,7%) e a elemicina (4,9-13,6%). Dos monoterpenos destacam-se o a-pineno (10-25,9%) e o acetato de geranilo  (3,4-16%) e dos sesquiterpenos o b-bisaboleno (8,3-15,1%).
D. halophilus carateriza-se por ter teores elevados de fenilpropanóides, em especial elemicina (15-31%). Dos hidrocarbonetos monoterpénicos distingue-se o a-pineno (12,2-23%) e o sabineno e (9-29%).     
D. carota subsp. gummifer e D. carota subsp. carota caracterizam-se por ter percentagem elevada de a-pineno (11-31% e 13-27,1%, respetivamente) e acetato de geranilo (18-55% e 28,7-65%, respetivamente) e ter baixo teor de fenilpropanóides. No óleo destes dois taxa algumas pequenas diferenças foram observadas nos teores de carotol e de 11aH-himachal-4-en-1-β-ol, dependendo da origem geográfica das plantas.

Tabela 39: Composição dos óleos essenciais das quatro subspécies de Daucus carota L. em Portugal Continental.


RIa

RIb

Compostosa

Percentagem (%)

D. carota subsp. maximus

D. carota subsp. gummifer

D. carota subsp. carota

D. carota subsp.  halophilus

922

1030

α-Tujeno

v-0,2

v-0,2

v

0,2-0,4

930

1030

a-Pineno

10,0-25,9

11,0-31,0

13,0-27,1

12,2-23,0

943

1073

Canfeno

0,5-1

0,6-1

0,5-0,6

0,3-0,5

964

1128

Sabineno

1,2-1,3

2,1-10

0,6-0,9

9,0-29,0

970

1118

b-Pineno

4,0-6,8

3,8-5,2

2,3-4,5

2,2-2,8

980

1161

Mirceno

1,4-3,0

2,1-3,7

1,2-2,5

2,0-3,1

997

1171

α-Felandreno

 

v

 

v-0,1

1010

1187

a-Terpineno

 

0,1-0,7

 

0,3-1,3

1011

1275

p-Cimeno

 

v-0,3

 

0,1-0,3

1020

1206

Limoneno

1,8-3,3

5,8-9,0

1,2-9,0

5,5-12,0

1020

1215

β-Felandreno

0,3-0,4

v-0,5

 

0,1-0,5

1025

1235

Z-b-Ocimeno

v-0,1

0,6-2

0,1-0,2

0,1-0,5

 

 

cis-Verbenol

v-0,1

 

 

 

1035

1250

E-b-Ocimeno

v-0,1

0,2-4,1

0,1-0,2

v-0,1

1046

1249

g-Terpineno

 

0,2-1,7

 

0,8-2,6

1050

1458

trans-Hidrato de sabineno

 

v-0,3

 

0,1-0,4

1162

1624

Mirtenal

0,1-0,2

 

 

 

1169

1690

a-Terpineol

v-0,1

 

 

 

1076

1288

Terpinoleno

 

v-0,3

 

0,2-0,5

1081

1543

Linalool

0,9-1,3

0,4-1

1,3-1,6

0,5-1,1

1081

1542

cis-Hidrato de sabineno

 

v-0,2

 

v-0,1

1105

1556

cis-p-2-Menteno-1-ol

 

v-0,1

 

0,1-0,2

1120

1620

trans-p-2-Menteno-1-ol

 

v

 

v-0,2

 

 

trans-Verbenol

 

 

v-0,1

 

1135

1553

Pinocarvona

 

 

 

t

1144

1695

Borneol

 

 

 

t

1158

1597

Terpineno-4-ol

 

0,1-2,1

v-0,1

2,0-4,7

1169

1692

a-Terpineol

 

v-0,1

v-0,1

0,2-0,3

1176

1699

Verbenona

 

 

v-0,1

 

1177

1673

cis-Piperitol

 

 

 

0,1-v

1187

 

trans-Piperitol

v

v

 

v

1208

 

Nerol

 

 

v-0,1

 

1233

1838

Geraniol

 

 

0,5-1,2

 

1239

1555

Acetato de linalilo

0,1-0,3

 

 

 

1240

1730

Geranial

 

 

v-0,3

 

1264

1574

Acetato de bornilo

 

0,3-0,4

 

0,1-0,3

1330

1465

d-Elemeno

 

v-0,1

 

0,1-0,4

1328

1688

α-Terpinil acetato

 

0,1-0,3

 

0,1-0,4

1341

1723

Acetato de nerilo

 

 

v-0,1

 

1346

 

a-Longipineno

 

 

v-1,0

0,1-0,3

1363

2225

Acetato de geranilo

3,4-16,0

18,0-55,0

28,7-65,0

v-1,0

1369

1487

a-Copaeno

 

v-0,1

 

v-0,1

1369

2006

Metileugenol

0,1-0,2

 

 

v-0,3

1381

1534

b-Cubebeno

v

v

 

 

1383

1586

b- Elemeno

 

v-0,1

 

v-0,1

1405

1563

a-Cedreno

 

 

 

0,1-0,3

1411

1563

Aristoleno

 

 

 

t-0,2

1411

1590

E-b-Cariofileno

0,1-0,5

0,6-1,1

0,4-1,3

0,5-1,4

1442

1662

a-Humuleno

 

0,3-0,6

v-0,1

v-0,1

1446

1661

trans-b-Farnesol

 

 

 

v-0,3

1448

1665

trans-b-Farneseno

0,1-0,3

0,2-0,3

v-0,1

 

1461

2219

E- Metilisoeugenol

8,2- 15,7

 

1,0-1,3

0,5-7,4

 

 

Neocalitropseno

 

 

0,1-0,5

 

1466

1699

Germacreno D

 

2-5,5

v-0,2

0,1-0,3

1473

1708

b-Selineno

v

 

v-0,1

 

1484

1724

Biciclogermacreno

v-0,1

v-0,3

0,1-0,3

0,2-0,3

1489

 

b-Himachaleno

 

v-0,1

v-1,3

0,1-0,3

1498

1720

b-Bisaboleno

8,3-15,1

 

0,3-0,5

0,4-3,5

1508

1751

d-Cadineno

 

 

 

0,2-0,5

1518

 

Elemicina

4,9-13,6

 

0,1-1,6

15,0-31,0

1530

1766

E-a-Bisaboleno

0,5-4,2

0,1-0,2

 

v-0,3

1542

1816

Germacreno B

 

 

 

v-0,2

1557

1968

Óxido de Cariofileno

v

 

0,1-0,2

0,1-0,3

1581

2001

Carotol

v-0,2

5,0-15,0

1,5-6,1

 

1618

2174

T- Muurolol

 

v

 

t-0,3

1622

2089

11aH-himachal-4-en-1-b-ol

 

0,1-1,1

0,5-9,4

 

1630

2219

T-Cadinol

 

v-0,1

 

v-0,2

1630

2216

a-Cadinol

 

v-0,2

 

0,1-0,7

1644

1755

a-Asarona

5,8-25,8

 

 

 

1663

 

b-Bisabolol

 

v-0,4

 

v-0,1

1668

 

Cânfora de juniperus

 

 

 

0,2-0,6

1777

 

Isocalamendiol

 

 

 

0,1-0,3

v: vestígios (< 0.05 %); IRa: Índices de retenção na coluna SPB-1; IRb: Índices de retenção na coluna SupelcoWax-10.
a Compostos ordenados por ordem de eluição na coluna SPB-1.

Eryngium duriaei J. Gay ex Boiss.

Conforme descrito na seção 2.1.5., para avaliar as relações taxonómicas relativamente a determinados carateres morfológicos, o nível de ploidia e conteúdo de DNA nuclear foram analisadas plantas silvestres das quatro populações de Eryngium duriaei, na Serra da Estrela, Parque da Peneda Gerês e duas populações da Serra do Açor (Margaraça e Colcurinho), resultados descritos na seção 3.1.3.2. Para complementar estes estudos foi realizada a caracterização dos óleos essenciais das partes aéreas de indivíduos das mesmas quatro populações.
Os constituintes dos óleos essenciais estão indicados na Tabela 40, de acordo com a  eluição numa coluna de polidimetilsiloxano.
Os óleos são predominantemente formados por hidrocarbonetos sesquiterpénicos e sesquiterpenos oxigenados. Os derivados do cariofilenos são constituintes químicos importantes em todas as amostras (Tabela 40).

Tabela 40: Composição do óleo essencial de populações de Eryngium duriaei.


IRa

IR b

Compostosa

Percentagem (%)

Colcurinho
< 1.700 m

Gerês
< 1.700 m

Margaraça
< 1.700 m

Estrela
> 1.700 m

929

1030

a-Pineno

0,7

0,4

0,2

v

978

1290

n-Octanal

0,4

0,6

0,2

1,8

978

1161

Mirceno

v

v

v

v

1019

1206

Limoneno

v

v

v

1,2

1024

1237

Z-b-Ocimeno

0,3

0,6

0,8

-

1034

1255

E-b-Ocimeno

0,8

0,3

v

-

1079

1393

n-Nonanal

v

v

v

-

1181

1495

n-Decanal

0,7

v

v

0,3

1235

n.d

2-Decenal

0,1

v

v

0,5

1327

n.d.

Bicicloelemeno

v

v

v

v

1369

1493

a-Copaeno

-

-

-

1,4

1376

1518

b-Burbuneno

-

-

-

0,4

1386

1585

b-Elemeno

0,7

0,3

0,5

2,9

1386

n.d.

n-Dodecanal

v

v

0,1

t

1408

1595

E-b-Cariofileno

6,6

12,2

5,8

6,0

1440

1665

a-Humuleno

0,3

0,4

0,4

1,4

1444

1665

E-b-Farneseno

0,4

0,2

0,4

0,5

1461

1685

a-Neocalitropseno

28,0

32,3

53,0

-

1464

1680

g-Muuroleno

-

-

-

0,4

1468

1676

g-Curcumeno

0,8

0,7

0,4

-

1468

1699

Germacreno D

-

-

-

5,6

1471

1711

b-Selineno

3,1

2,4

1,5

3,0

1481

1727

Biciclogermacreno

3,4

3,8

2,4

-

1483

1714

a-Selineno

-

-

-

1,2

1491

1752

Germacreno A

-

-

-

0,6

1503

n.d.

Z-Calameleno

-

-

-

0,5

1508

1749

δ-Cadineno

-

-

-

1,8

1521

1904

a-Calacoreno

-

-

-

0,5

1556

1969

Óxido de Cariofileno

7,4

7,3

4,1

47,3

1556

2112

Espatulenol

1,0

0,2

0,5

-

1561

2063

Globulol

0,5

0,2

0,5

-

1567

1992

Salvial-4(14)-en-1-one

-

-

-

1,2

1583

2022

Óxido de Humuleno

1,1

0,4

0,4

4,1

1615

2145

Isocariofileno-14-al (β-Betulenal)

15,8

15,8

8,5

1,1

1631

2214

a-Cadinol

-

-

-

1,7

1637

2344

14-Hidroxi-b-cariofileno

13,7

6,6

5,8

-

 

 

Total

86,1

85,0

85,9

85,6

v: vestígios (< 0.05 %); IRa: Índices de retenção na coluna SPB-1; IRb: Índices de retenção na coluna SupelcoWax-10.
a Compostos ordenados por ordem de eluição na coluna SPB-1.

Foram encontradas diferenças significativas nos constituintes principais dos óleos das plantas de populações de diferentes altitudes, acima ou abaixo dos 1.700 metros (Tabela 40).
Os óleos obtidos de plantas em diferentes regiões de altitude menor que 1.700 m são caracterizados por quantidades elevadas de α-neocalitropseno (28-53%), b-betulenal (8,5-15,8%) e 14-hidroxi-β-cariofileno (5,8-13,7%), enquanto o óleo das plantas da população da Serra da Estrela (acima de 1.700 m) é caracterizado por teores elevados de óxido de cariofileno (47,3%) e E-b-cariofileno (6%). O composto principal do óleo de populações localizadas a menos de 1.700m, α-neocalitropseno, não está presente no óleo das populações que se encontram na Serra da Estrela, onde foi possível recolher material em anos diferentes. Constatámos que não há variação na composição do óleo das populações desta região, e que este é sempre caracterizado por níveis elevados de óxido de cariofileno.

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